Apports de la LC-MS/MS pour le diagnostic et le suivi des Hyperplasies Congénitales des Surrénales

A. Lamazière*^a (Dr), J. Guéchot^b (Dr), N. Helin^b (M.), Y. Le Bouc^a (Pr), J. Fiet^b (Pr)

^a AP-HP/UPMC/INSERM, Paris, FRANCE ; ^b AP-HP, Paris, FRANCE

* antonin.lamaziere@upmc.fr

Objectifs : Développer un profil stéroïdien quantitatif par spectrométrie de masse pour l’étude des déficits enzymatiques surrénaliens (DES) et ainsi substituer la LC-MS/MS aux approches analytiques de RIA.

Matériel et Méthodes: Extraction de 0.15 ml de sérum (SLE, Biotage) ; HPLC (C18, Phenomenex Core-shell) ; LC-MS/MS (ABSiex Qtrap6500).

Populations étudiées : prématurés, nouveaux nés (<4 semaines), enfants (<15 ans) sans DES (DES-) ou avec déficits en 21 Hydroxylase(DES21).

Résultats : Analyse simultanée de 15 stéroïdes : Cortisol, 17OH-Progestérone (17OHP), 21-Désoxy-Cortisol (21DF), Cortisone , Aldostérone, Désoxycorticostérone (DOC), Corticostérone, 11-Désoxy-Cortisol (11DF, composé S), 11β-OH-Androstènedione, DHEA , 17OH-Prègnénolone, Progestérone, Prègnénolone, delta4-Androstènedione et Testostérone.

• Seuils de détection très inférieurs à la RIA (LOQ : 15pg/ml pour la testostérone)
• Très bonne corrélation entre LCMS et RIA notamment pour Testostérone, delta4-Androstènedione, Cortisol et 17OHP (sauf en situation de prématurités où la 17OHP est surestimée par RIA du fait de valeurs transitoirement élevées de 17OH-Prègnénolone).
• Chez les prématurés, le 21DF (<0,2 ng/ml) permet d’affirmer l’absence de DES21.
• En dehors de la prématurité, le 21DF et la 17OHP sont très fortement corrélés (r=0.89,p<0.0001), au moment du diagnostic comme pendant le suivi thérapeutique des DES21.
• La DOC, la Corticostérone, l’Aldostérone fortement diminués dans les DES21/DES-(p<0.0001) suggèrent une perte de sel.

Discussion. A partir d’un volume de 150μl sérum, les dosages quantitatifs simultanés de 15 stéroïdes améliore l’étude des DES21 et des autres déficits enzymatiques surrénaliens (17-hydroxylase, 3βol-déshydrogénase, 11-hydroxylase).

L’auteur n’a pas transmis de déclaration de conflit d’intérêt.