Les approches lipidomiques et métabolomiques identifient les MAM (mitochondria-associated membranes) comme la cible cellulaire du mitotane.
S. Hescot*a (Dr), M. Lhommeb (Dr), A. Dubowc (Mlle), L. Amazitc (Dr), S. Traversc (M.), S. Battinid (Mlle), I. Namerd (Dr), A. Lombese (Dr), A. Kontushf (Dr), A. Pacia (Dr), A. Imperialed (Dr), E. Baudina (Dr), M. Lombesc (Dr)
a Gustave Roussy, Villejuif, FRANCE ; b ICAN, Paris, FRANCE ; c INSERM UMRS-1185, Le Kremlin-Bicêtre, FRANCE ; d ICube UMR 7357, Strasbourg, FRANCE ; e INSERM UMRS-1016, Paris, FRANCE ; f INSERM UMRS-ICAN 1166, Paris, FRANCE
* segolene.hescot@gustaveroussy.fr
Le mitotane (o,p’-DDD), standard du traitement du corticosurrénalome impacte les fonctions mitochondriales mais sa cible moléculaire reste inconnue. Nous avons utilisé des techniques de métabolomique et de lipidomique pour mieux comprendre le mécanisme d’action intracellulaire du mitotane sur le modèle cellulaire humain corticosurrénalien H295R.
L’étude par spectroscopie NMR du contenu en métabolites et composés énergétiques met en évidence, pour la première fois, une diminution significative (- 40%) de l’aspartate associée à une augmentation (+ 30%) du glutamate, sous mitotane de façon temps (dés 6 h) et concentration (dès 10 mM) dépendantes. Cette signature spécifique pourrait refléter la déplétion intracellulaire en NAD+ secondaire au dysfonctionnement de la chaîne respiratoire mitochondriale. Les analyses de lipidomiques des contenus intracellulaires et intramitochondriaux en phospholipides montrent une augmentation significative du rapport phosphatidylserine/phosphatidylethanolamine sous mitotane, compatible avec une inhibition de l’activité de la phosphatidylserine decarboxylase (PISD), enzyme localisée dans les zones d’interaction entre reticulum endoplasmique et mitochondrie appelées MAM. Les western-blots démontrent que l’expression protéique d’autres composants du MAM (PISD, DRP1 ou ATAD3A) est inhibée par le mitotane. Enfin, le PK11195, inhibiteur de TSPO, récepteur du cholestérol présent sur les MAM, agit en synergie avec le mitotane, conduisant à un effet pro-apoptotique, déséquilibrant la fission/fusion mitochondriale (immunocytochimie) et inhibant la stéroidogenèse (LCMS-MS).
Ce travail suggère que les MAM constituent le complexe moléculaire cible du mitotane. L’inhibition de TSPO potentialise l’effet cytotoxique du mitotane et pourrait constituer une nouvelle voie pharmacologique pertinente.
L’auteur n’a pas transmis de déclaration de conflit d’intérêt.